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合肥研究院在血紅素蛋白質去折疊光譜研究中取得進展

格圖在線 格圖在線 admin 2016-05-31 15:30 |

  血紅素蛋白是一類以血紅素作為輔基的蛋白質,它們在生物體內發揮多種重要功能,如氧運輸、電子傳遞、信號轉導、抗氧化等。其中,辣根過氧化物酶HRP是一種在結構-功能關系上研究較為深入的模式血紅素蛋白酶,在生化檢測如ELISA中也有著廣泛應用。其中的血紅素輔基不僅對酶的活性起關鍵作用,對維持蛋白質特定三維結構也有重要作用。但是,對于血紅素輔基如何影響血紅素蛋白構象以及對此過程如何進行快速檢測,還是一個值得探討的問題。

 中國科學院合肥物質科學研究院技術生物與農業工程研究所黃青課題組利用不同濃度的尿素處理HRP溶液以得到不同構象(天然態及去折疊態)的蛋白樣品后者與一定濃度的過氧化氫反應生成一種發射峰位于450nm的熒光產物,該產物其實來源于變性蛋白質中血紅素被過氧化氫所降解。研究發現,隨著尿素濃度增加(蛋白去折疊),該產物熒光強度顯著增強。基于此熒光強度,可以對HRP在不同濃度的尿素處理下的構象進行定量分析,并且將所得的去折疊熱力學參數與常用的蛋白質構象分析方法(圓二色光譜、色氨酸熒光光譜)所得參數進行比較。結果表明,三種方法所得到的結果吻合,從而證明了利用血紅素蛋白中輔基血紅素降解產物熒光信號可以對血紅素蛋白構象進行快速和定量分析。

 這項工作曾得到中科院“百人計劃”、國家自然科學基金等項目的資助。

 

 基于血紅素-過氧化氫反應產物熒光強度的HRP構象分析

 



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